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PEDV Nsp10基因真核表达载体的构建及蛋白的表达

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猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)为猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)的病原体.Nsp10是PEDV编码的一种非结构蛋白,在病毒的复制过程中发挥着重要的作用.为研究在病毒侵染宿主细胞时Nsp10蛋白发挥的作用,通过RT-PCR技术扩增Nsp10基因片段,利用同源重组的方法将Nsp10基因连接到pCMV-Myc载体,成功构建了PEDV Nsp10基因的真核表达载体.酶切鉴定及测序结果证实,PEDV Nsp10基因成功克隆到pCMV-Myc载体中,并将重组质粒命名为pCMV-Myc-Nsp10.将重组质粒pCMV-Myc-Nsp10通过脂质体转染至IPEC-J2细胞中,利用Western Blot和间接免疫荧光技术检测pCMV-Myc-Nsp10的表达以及定位情况.结果显示,pCMV-Myc-Nsp10在IPEC-J2细胞中成功表达,并且均匀分布在细胞质和细胞核中,为后续研究PEDV Nsp10蛋白的生物学功奠定了基础.
Construction of Eukaryotic Expression Vector and Protein Expression of PEDV Nsp10 Gene

PEDVeukaryotic expression vectorNsp10 proteinexpression of protein

牛欣雨、郑亮、魏佳琪、武峰峰、吴志军、张华、曹宏伟

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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆 163319

黑龙江八一农垦大学动物科技学院

盐城师范学院

猪流行性腹泻病毒 真核表达载体 Nsp10蛋白 蛋白表达

黑龙江省自然科学基金联合引导项目

LH2019C046

2023

10.3969/j.issn.1002-2090.2023.04.012

黑龙江八一农垦大学学报
黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888
ISSN：1002-2090
年,卷(期)：2023.35(4)
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