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猪流行性腹泻病毒非结构蛋白Nsp14真核表达载体构建及蛋白表达鉴定

Construction of Eukaryotic Expression Vector and Protein Expression of PEDV Nsp14 Gene

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猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)Nsp14 蛋白是PEDV的一种非结构蛋白,由于它同时具有核酸外切酶活性和N7-甲基转移酶活性,在病毒的生命周期中发挥重要作用.为了对PEDV Nsp14 蛋白进行更加深入的研究,从病变猪小肠中提取总RNA,并通过PCR扩增获取PEDV Nsp14 基因,经过双酶切与连接试验,最终将其连接到PRK5-Myc载体上.通过构建PEDV Nsp14真核重组表达载体,并通过Western Blot技术和免疫荧光技术在真核细胞中验证其蛋白表达情况和细胞内定位情况,为后续研究PEDV Nsp14 蛋白的功能奠定研究基础.

porcine epidemic diarrhea virusNsp14eukaryotic expression vectorprotein expression

武峰峰、高振秋、郑亮、牛欣雨、魏佳琪、吴志军、张华、曹宏伟

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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆 163319

盐城师范学院药学院

黑龙江八一农垦大学动物科技学院

猪流行性腹泻病毒 Nsp14 真核表达载体 蛋白表达

黑龙江省自然科学基金联合引导项目江苏省盐土生物资源研究重点实验室开放基金国家级大学生创新创业训练计划

LH2019C046JKLBS2020005202210324271H

2023

10.3969/j.issn.1002-2090.2023.05.011

黑龙江八一农垦大学学报
黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888
ISSN：1002-2090
年,卷(期)：2023.35(5)
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