为了探究WRKY转录因子在植物抵抗逆境胁迫方面的重要作用,本研究通过基因克隆的方法,从高粱BTx623中克隆得到一个WRKY转录因子基因(SbWRKY71),该转录因子基因全长1335 bp(phytozome登录号:Sb04g005520),编码364个氨基酸,分子量为38.95 kDa;预测该转录因子定位于细胞核,具有WRKY转录因子典型的保守结构域,且该蛋白属于WRKY蛋白家族的第Ⅱ组成员.系统进化树分析表明,高粱SbWRKY71氨基酸序列与禾本科作物玉米ZmWRKY71的亲缘关系最近,为75％;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测表明,SbWRKY71基因表达具有组织特异性,在叶中表达丰度最高,茎中最低.经激素水杨酸(SA,1 mmol·L-1)、吲哚-3-乙酸(IAA,10 μmol· L-1)和脱落酸(ABA,200μmol· L-1)处理后,SbWRKY71的表达量呈现先下降后升高再下降的趋势;在γ-氨基丁酸(GABA)和甘露醇(D-Mannitol,300 mmol· L-1)模拟干旱胁迫以及氯化钠(NaCl,250 mmol·L-1)盐胁迫处理下,Sb WRKY71的表达量均先升后降,分别在3、6和9h达到最大值;高粱经病原相关分子模式(PAMPs)flg22(100 nmol· L-1)、翻译延长因子(elf18,100 nmol· L-1)处理后,SbWKY71表达均受到抑制,但在几丁质(Chitin,8 nmol· L-1)处理下,Sb WRKY71受到诱导表达.本研究为进一步探索SbWKY71基因在调节高粱抗性、响应激素以及逆境胁迫应答等过程中的作用机制提供了基础.
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