为实现对微囊藻毒素-LR(MC-LR)的快速检测,本试验基于适配体的纳米金(AuNPs)比色法原理,通过优化盐溶液浓度、MC-LR的适配体浓度,建立了一种灵敏、简单、高效的检测方法.依据已报道的微囊藻毒素的原始适配体序列,利用Mfold软件对其二级结构进行拟合分析,采用定点突变法优化适配体序列,获得与原适配体(Apt-1)结构完全不同的适配体-3(Apt-3).其中(Apt-1)-AuNPs体系检测MC-LR,目视检测限为70 ng·mL-1,(Apt-3)-AuNPs体系则能达到30 ng·mL-1;当体系NaCl浓度为0.05 mol·L-1时,适配体浓度为0.06 μmol·L-1,以Apt-3构建的AuNPs定量检测MC-LR,其线性范围为0～120 ng·mL-1,线性回归方程为y=0.007x+0.564(R2=0.988 5),线性关系良好,其理论最低检测限为7.08 ng·mL-1.同时对建立的Apt-AuNPs体系的特异性进行考查,结果表明,与Apt-1相比,经突变后的Apt-3依然具有高特异性,与MC-LR的亲和力提高.本研究为后续进行适配体序列与结构的优化,开发灵敏度更高的传感器提供了依据.
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