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基于酿酒酵母的多片段质粒的构建

Construction of multi-fragments plasmid based on Saccharomyces cerevisiae

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为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端,提高多片段质粒构建效率,以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例,利用酿酒酵母活体细胞重组系统,一次性将多个外源 DNA片段和线性化质粒重组,形成环状质粒.通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入 50 bp重叠序列,用PCR扩增DNA片段后,与线性化质粒一起转化酿酒酵母,再用 PCR 和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性.通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短.

vector constructionmulti-fragments plasmidyeast homologous recombination system

汤雅萍、程毅、王吐虹、陈佳、高春生、郭利桃、宋志强、唐超、严准、李智敏

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中国农业科学院麻类研究所,湖南 长沙 410205

质粒构建 多片段质粒 酵母同源重组系统

中国农业科学院科技创新工程项目湖南省自然科学基金湖南省植保植检站植物防疫防控科研项目

ASTIP-IBFC-042015JJ3128HNZB202104

2023

湖南农业大学学报(自然科学版)
湖南农业大学

湖南农业大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.868
ISSN:1007-1032
年,卷(期):2023.49(4)
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