摘要
目的 探讨炎性微环境下巴戟天多糖(MOP)对牙周膜细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达的影响.方法 将30只大鼠随机分为对照组(n=6)和模型组(n= 24),模型组采用正畸丝结扎法建立牙周炎模型,3周后每组各处死6只大鼠,Micro-CT检测确认建模成功.剩余模型组大鼠随机分为牙周炎自然恢复组、生理盐水(NS)组和MOP组.MOP组于大鼠左上颌第一磨牙腭侧注射MOP[200 mg/(kg·3d),50 µL,持续4周],NS组注射等体积NS,牙周炎自然恢复组不做任何处理.取大鼠左上颌骨组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察牙周膜细胞病理改变,免疫组织化学检测SIRT1、NLRP3表达量.体外培养人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs),CCK-8检测MOP对细胞活性的影响.将第4代细胞分为对照组、炎症组(10 µg/mL脂多糖)及实验组(5 µmol/L MOP,5 µmol/L MOP+10 µg/mL脂多糖).利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blot检测SIRT1和NLRP3表达变化,免疫沉淀及酶联免疫法(ELISA)分别检测NLRP3乙酰化及白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量.采用Prism 9.0软件对数据进行统计学分析.结果 在体内实验中,MOP组较牙周炎自然恢复组和NS组NLRP3表达下降,SIRT1表达升高(P<0.05),炎细胞浸润减少.在体外实验中,与对照组相比,炎症组NLRP3 mRNA和蛋白表达量均增高(P<0.05),SIRT1表达降低(P<0.01);MOP能上调炎症细胞SIRT1表达(P<0.05),降低NLRP3表达及其乙酰化水平(P<0.05),减少上清液中IL-1β、IL-18含量(P<0.01).结论 炎性牙周膜细胞SIRT1表达降低,NLRP3表达升高;MOP干预能促进SIRT1表达,导致NLRP3表达受抑制,同时通过去乙酰化作用使NLRP3乙酰化水平下降,从而NLRP3活性降低,由此发挥抑制炎症作用.
基金项目
海南省重点研发计划(ZDYF2021SHFZ229)
海南省自然科学基金(ZDYF2021SHFZ229)
海南省自然科学基金(822CXTD534)
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