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猪伪狂犬病病毒gD和gE蛋白间接ELISA检测方法的建立及联合应用

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为建立一种能够快速鉴别检测猪伪狂犬病毒(PRV)疫苗免疫抗体和野毒抗体的方法,分别对PRV的gD蛋白和gE蛋白进行原核表达,以其重组蛋白作为检测抗原分别建立了gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法,并联合应用两种检测方法对临床血清样品进行检测.结果表明:获得了以包涵体形式表达的重组gD蛋白和重组gE蛋白,经Western blot检测表明两种重组蛋白均具有良好的免疫学活性;gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法检测PRV阳性血清的最低检出效价分别为1:25600和1:12800,gD-间接ELISA方法检测PRRSV、CSFV、PPV、PCV-2、PEDV、TGEV阳性血清均为阴性;gE-间接ELISA方法检测PRV疫苗免疫血清以及PRRSV、CSFV、PPV、PCV-2、PEDV、TGEV阳性血清均为阴性;建立的gD和gE蛋白的两种间接ELISA方法的批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5％和7％;联合应用gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法检测2156份临床血清样品,PRV抗体阳性率为88.96％,PRV野毒抗体阳性率为4.04％,PRV免疫抗体阳性率为84.93％.说明建立的gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法均具有良好的敏感性、特异性、重复性,两种方法的联合应用实现了PRV免疫抗体和野毒抗体的鉴别检测.
Establishment and Combined Application of gD and gE Indirect ELISA for Detection of Porcine Pseudorabies Virus

林东文、王宝琴、张艳、刘博、王文秀

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福建省龙岩市新罗区农业农村局,福建 龙岩 364000

滨州学院 生物与环境工程学院,山东 滨州 256600

海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南 海口 571100

山东省滨州畜牧兽医研究院,山东 滨州 256600

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猪伪狂犬病 间接ELISA 野毒抗体 免疫抗体

山东省外专双百计划海南省家畜家禽工程技术研究中心开放课题

WST2018014HLP201801

2022

10.3969/j.issn.1673-1182.2022.11.012

家畜生态学报
西北农林科技大学

家畜生态学报

CSTPCD北大核心
影响因子：0.635
ISSN：1673-1182
年,卷(期)：2022.43(11)
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