摘要
目的:探讨人宫颈癌原代细胞的分离、培养、鉴定方法以及细胞周期蛋白50A(CDC50A)对其生物学特性的维持作用.方法:收集2017年1月～2018年2月期间在妇科进行宫颈手术的24例宫颈癌患者和10例行子宫全切术患者的宫颈组织标本;采用蛋白酶消化法分离宫颈癌组织,通过原代培养、流式细胞术分选法将宫颈癌原代细胞分为CDC50A+Lin-细胞组,CDC50A-Lin-细胞组,采用MTT法测定各表型细胞体外增殖活性以及体内成瘤能力;采用端粒重复扩增法(TRAP)结合电泳及银染法测定端粒酶活性.结果:①宫颈癌原代细胞表型CDC50A+Lin-的细胞仅占0.95％ ～5.64％;且宫颈癌组织中CDC50A阳性表达率为87.5％,明显高于正常宫颈黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);②CDC50A+Lin-细胞体外增殖活性以及集落形成能力明显高于CDC50A-Lin-细胞和未分选细胞,差异有统计学意义(P<0.05);③裸鼠皮下接种CDC50A+Lin-细胞,2周就可观察到明显的新生肿瘤块,成瘤率明显高于接种CDC50A-Lin-细胞和未分选细胞,差异有统计学意义(P<0.05);④CDC50A+Lin-细胞端粒酶相对表达强度为显著高于对照组细胞和CDC50A-Lin-细胞,差异有统计学意义(P<0.05).结论:CDC50A有可能是分选人宫颈癌干细胞的表面标志物,CDC50A+Lin-细胞具有肿瘤干细胞的生物学特性.
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