摘要
目的:探讨原发性肝癌患者外周血内外泌体中甲胎蛋白(AFP)、高尔基体跨膜糖蛋白73(GP73)、超氧化物歧化酶(SOD)的表达水平,以及其在肝癌治疗中的价值与意义.方法:收集2018年9月~2019年9月在广西中医药大学第一附属医院、广西中医药大学附属瑞康医院住院部诊疗的60位肝癌患者,以及同期行常规体检的60位健康者.采取外泌体提取试剂盒提取分离位于外周血中的外泌体,行乙酰胆碱酯酶(AchE)实验测量外泌体浓度,通过免疫印迹实验检测外泌体特异表面标志物凋亡转接基因2互作蛋白x(Alix)、溶酶体相关膜蛋白3(CD63)蛋白的表达水平,透射电子显微镜以观察外泌体的形态.经电化学发光法、酶联免疫吸附法等用以评估分析外泌体中AFP、GP73、SOD的表达水平,分析肝癌患者血清外泌体中AFP、GP73、SOD表达水平的变化,分析外泌体中相关指标是否与血液中相关指标的表达同步,以及其在肝癌诊断、治疗效果评价中的作用.结果:分离出的外泌体经电镜观察及蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测,显著具备外泌体特征.经AchE实验,肝癌患者的外泌体含量高于健康捐献者,差异有统计学意义(P<0.001).肝癌患者外泌体中AFP、GP73的表达水平高于健康捐赠者,差异均有统计学意义(P<0.001),而其中SOD的表达水平则低于健康捐赠者,差异均有统计学意义(P<0.001),并均与血液中相关指标的表达同步.结论:外泌体在肝癌的发生、发展过程中起到重要作用,血清诊断指标AFP、GP73、SOD有望成为外泌体诊断肝癌及治疗评价的潜在指标.
基金项目
国家自然科学基金地区科学基金(81860805)
广西中医药大学第一批"歧黄工程"高层次人才团队培育项目(2018001)
广西中医药大学2017年青年创新研究团队项目(2017QT001)
广西中医药大学一流学科建设重点项目(2018XK010)
广西中医药大学硕士研究生创新项目(YCXJ2021003)