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沙棘枝枯病的定量检测体系构建和应用

Construction and application of a quantitative detection system for sea buckthorn stem wilt

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[目的]找到一种灵敏度较高的定量检测沙棘枝干以及土壤中病原菌的方法,为沙棘枝枯病的早期诊断和防控提供参考.[方法]以17份沙棘枝条样本、4份沙棘根际土壤样本为材料,提取拟枝孢镰刀菌DNA,基于翻译延伸因子(EF-1α)设计特异性扩增拟枝孢镰刀菌的引物,检测PCR引物的特异性,检测拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR的灵敏性,并采用实时荧光定量PCR技术检测沙棘枝条和根际土壤微生物DNA样品.[结果]建立了拟枝孢镰刀菌质粒检测标准曲线(R2=0.9849),使用该曲线得到的每微升DNA样本的检测拷贝数是103～108.拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测结果表明,在17份枝条样品和4份土壤微生物DNA样品中,有7份样品出现荧光信号.[结论]与普通PCR扩增方法相比,建立的拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测体系的检测结果更精确,其具有更强的实用性和可操作性,既可以用于定性检测病原菌,又可以用于定量检测沙棘枝干和土壤中病原菌密度.实时荧光定量PCR技术凭借其优异的特异性和灵敏性可以被广泛地应用于多种植物、空气和土壤中病原菌含量的测定.

陈悦、孙思雨、胡建忠、郝凯强、于曼、吴元华、夏博

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沈阳农业大学,辽宁 沈阳 110866

水利部沙棘开发管理中心,北京 100038

沙棘枝枯病 拟枝孢镰刀菌 实时荧光定量PCR 分子检测

水利部沙棘开发管理中心沙棘病虫害研究专项

2019-zk-kj-012

2022

10.14067/j.cnki.1003-8981.2022.01.028

经济林研究
中南林业科技大学

经济林研究

CSTPCD北大核心
影响因子：1.423
ISSN：1003-8981
年,卷(期)：2022.40(1)
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