摘要
为探讨猪受体卵母细胞体外成熟过程中第1极体(pbⅠ)与细胞核相对位置的动态变化规律及其对去核效率的影响,准确判定受体卵母细胞去核"窗口期"提供试验依据.将体外采集的GV(Germinal vesicle)期卵母细胞随机分为3组,分别成熟培养 42~44 h、44~46 h、46~48 h,并采用Hoechst33342荧光染色法对成熟过程中pbⅠ与细胞核相对位置进行检测判定.结果显示,随着体外成熟时间的延长,卵母细胞的成熟率呈逐渐增加的趋势,但pbⅠ与细胞核的位置发生偏离的比率逐渐增加,而去核率则表现为逐渐降低的趋势,pbⅠ偏离率与去核率之间呈现一定程度的负相关;体外成熟 44~46 h,既能获得较高的卵母细胞成熟率(80.2%),又可以保证理想的去核率(81.2%).说明延长体外成熟时间所造成的去核率显著降低与pbⅠ发生偏离有关,体外成熟 44~46 h是该试验条件下猪受体卵母细胞去核的最佳"窗口期".
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)(2008AA101003)
农业部"十一五"科技支撑计划(2008BADB2B11)
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-143B)