从染料废水中分离出以3,4-二氯苯胺(3,4-DCA)为唯一碳源和能源生长的革兰氏阴性菌,筛选其中两株形态差异较大的菌株P11-1和L13构建混合菌群,用于3,4-DCA的转化实验以削减其毒性.通过优化两株菌配比构建混合菌群,混合菌群对3,4-DCA转化率达73.33%,明显高于单菌.经菌株形态观察和16S rDNA序列分析,确定两株菌均为铜绿假单胞菌.以单因素实验考察混合菌群在3 d内对100 mg/L 3,4-DCA的转化能力,并通过正交实验进一步优化转化条件,得出最佳条件组合为:接菌量3%(体积分数),温度30℃,pH=8.0,摇床转速190 r/min,在该条件下3,4-DCA转化率达89.26%,其中pH对菌群转化能力影响最大.GC-MS分析菌群代谢产物主要为3,4-二氯乙酰苯胺,酶活分析发现N-乙酰基转移酶(NAT)活性较高,即菌群通过乙酰化对3,4-DCA进行解毒.