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miRNA34a外泌体构建及其抑制口腔鳞癌细胞增殖的体外实验研究

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目的:运用加载miRNA34a的外泌体治疗口腔鳞状细胞癌.方法:采用超速离心的方法从HEK293细胞的培养上清液中提取外泌体,结合透射电子显微镜、纳米粒子追踪分析仪、Western blot实验鉴定外泌体,进而利用共孵育的方法将疏水性修饰的miRNA34a模拟物加载到外泌体中,以构建含miRNA34a的外泌体(exo-miRNA34a),倒置荧光显微镜下观察加载效率.将exo-miRNA34a接种于口腔鳞癌细胞HN6中,利用激光共聚焦显微镜观察HN6细胞对外泌体的摄取,结合CCK-8实验检测HN6细胞增殖的变化.结果:在HEK293细胞培养上清液提取物中观察到40～150 nm大小的小囊泡,囊泡粒径分布峰值为97.9 nm;肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)和CD63表达阳性,钙联蛋白(Calnexin)表达阴性.疏水改性的miRNA34a可有效加载到外泌体中,载药率约为47％,载药后外泌体粒径增加,其完整性不受影响.exo-miRNA34a可以进入HN6细胞中,对HN6细胞的增殖具有明显抑制作用(P<0.05).结论:外泌体介导的miRNA34a可明显抑制口腔鳞癌HN6细胞的增殖.
Experimental study in vitro on miRNA34a exosomes fabrication and its inhibition on cell proliferation of oral squamous cell carcinoma

邓威、王晨星、金齐尧、毛广艳、孟颖、李怀奇、叶金海

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南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室,南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科,江苏 南京210029

miRNA34a 外泌体 口腔鳞癌 增殖 HEK293细胞 HN6细胞

国家自然科学基金"科教强卫工程"医学重点人才项目江苏高校优势学科建设工程资助项目

81371123zDRCA20160872018-87

2020

口腔生物医学
南京医科大学

口腔生物医学

CSTPCD
影响因子：0.423
ISSN：1674-8603
年,卷(期)：2020.11(2)
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