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人类甾类激素加工酶CYP7B1的纯化制备与互作网络

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细胞色素P450单加氧酶CYP7B1是位于内质网上的跨膜蛋白,其重要功能是催化胆固醇骨架7位的羟化反应,产生多种重要甾类分子,包括7α羟基-脱氢表雄酮和7α羟基孕烯醇酮等.CYP7B1基因突变造成的功能异常可引起多种疾病,如遗传性痉挛性截瘫和先天性胆汁酸合成障碍等.为了解人类CYP7B1蛋白的结构与功能,我们对其进行了重组表达与纯化,发现其在去垢剂DDM、DM、NM、OM中均能稳定存在并结合有氧化还原辅因子铁卟啉.利用纯化CYP7B1进行的亲和介质拉取-质谱分析发现,CYP7B1可以与另一种还原酶CYPOR发生相互作用,随后的体外互作分析证实了这一发现.在此基础上,通过重组共表达体系和体外组装方式的筛选实现了CYP7B1-CY-POR蛋白质复合物的纯化制备.本研究成功地进行了跨膜单加氧酶CYP7B1的纯化,并且发现内质网可能存在一个涉及CYP7B1和其他氧化还原酶的催化复合物,还进一步实现了CYP7B1-CYPOR复合物的纯化制备.
The expression and purification of human steroid hormone processing enzyme CYP7B1 and the characterization of its interactive network

简立艳、张庆、陈阳、曹禹

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上海交通大学医学院附属第九人民医院上海精准医学研究院,上海200125

中国科学院分子细胞科学卓越创新中心/生物化学与细胞生物学研究所,上海200031

细胞色素P450单加氧酶 内质网 膜蛋白 甾类合成 氧化还原酶复合物

82072468SSMU-ZLCX20180600

2021

10.1360/TB-2021-0087

科学通报
中国科学院国家自然科学基金委员会

科学通报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.269
ISSN：0023-074X
年,卷(期)：2021.66(22)
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