摘要
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)TMEM161B-AS1对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制.方法 以含30 mmol/L葡萄糖的培养基体外培养人肾小管细胞HK-2,分别转染TMEM161B-AS1过表达载体和阴性对照载体,设为TMEM161B-AS1组和对照组.qRT-PCR检测各组细胞TMEM161B-AS1和hsa-miR-135b表达.CCK-8法和流式细胞术分别检测各组细胞增殖和细胞凋亡情况.通过生物信息学软件LNCediting预测TMEM161B-AS1的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测不同细胞的相对荧光素酶活性.Western blot检测细胞上皮-间质转化表型蛋白的表达情况.结果 与对照组比较,TMEM161B-AS1组细胞TMEM161B-AS1表达水平明显升高,hsa-miR-135b表达水平及细胞凋亡率明显降低(P<0.01).与对照组比较,TMEM161B-AS1组细胞培养2~5 d增殖能力明显升高(P<0.05).与转染has-miR-NC比较,转染hsa-miR-135b能显著降低HK-2细胞TMEM161B-AS1 WT的荧光素酶活性(P<0.01).与对照组比较,TMEM161B-AS1组上皮细胞表型蛋白ZO-1、E-Cadherin、Claudin-1表达明显增加,间质细胞表型蛋白 α-SMA、Fibronectin表达明显降低(P<0.05).结论 lncRNA TMEM161B-AS1通过下调hsa-miR-135b表达,促进高糖诱导肾小管上皮细胞的增殖,抑制其凋亡及上皮-间质转化.
基金项目
湖北省卫生计生委中医药科研面上项目(ZY2019 M077)