[背景]长期砷暴露易造成其在肝脏内蓄积,从而导致肝脏病变.相关研究显示间充质细胞在肝纤维化中起着重要作用,且上皮-间质转化(EMT)是间充质细胞的主要来源之一.[目的]探讨不同剂量亚砷酸钠染毒对SD大鼠肝组织纤维化及EMT相关蛋白表达的影响.[方法]24只健康初断乳SD大鼠随机分为4组,每组6只,雌雄各半,分别为对照组(10 mL·kg−1生理盐水)、2.5 mg·kg−1亚砷酸钠组、5.0 mg·kg−1亚砷酸钠组和10.0 mg·kg−1亚砷酸钠组,灌胃染毒,每天一次,每周六次.每周称重大鼠一次,持续36周后收集大鼠血清及肝组织,称重并计算脏器系数.苏木精-伊红(HE)染色和马松(Masson)三色染色观察大鼠肝纤维化损伤病理改变程度;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肝纤维化相关蛋白透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、III型前胶原氨基端肽(PⅢNP)和Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)分泌水平;Western blot-ting法检测大鼠肝组织中肝星状细胞(HSCs)活化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1),以及EMT相关标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)表达水平.[结果]与对照组相比,染毒第36周时,10.0 mg·kg−1亚砷酸钠组雌、雄大鼠体重均降低(P<0.05),肝脏系数增加(P<0.05).病理染色结果显示:各亚砷酸钠染毒组大鼠肝组织可见大量炎性细胞浸润,肝实质细胞液化坏死、变性,同时,大鼠肝组织胶原纤维阳性着色面积均且随染砷剂量增加而逐渐上升(P﹤0.05).ELISA和Western blotting结果显示:5.0、10.0 mg·kg−1亚砷酸钠组HA、LN、PⅢNP、COL-Ⅳ分泌水平较对照组和2.5 mg·kg−1亚砷酸钠组增加(P﹤0.05);与对照组相比,各染砷剂量组大鼠肝组织中α-SMA、TGF-β1蛋白表达均上升(P﹤0.05),E-cadherin蛋白表达水平下降(P﹤0.05),而N-cadherin、Vimentin、Snail表达水平升高(P﹤0.05).[结论]亚砷酸钠暴露可诱导SD大鼠HSCs活化及肝纤维化损伤,导致细胞外基质分泌水平增加,同时伴有肝组织EMT,提示EMT与砷致肝纤维化损伤过程密切相关.
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