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美国白蛾几丁质酶细菌表达的RNA干扰载体构建及其介导的RNA干扰

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[目的]探索细菌表达dsRNA介导的RNAi在美国白蛾中的可行性,为RNAi技术在美国白蛾等林业害虫上的应用提供依据.[方法]选择几丁质酶HcChi基因作为靶标,设计有效的干扰片段,构建到L4440干扰载体上,并转入HT115大肠杆菌菌株.IPTG诱导HT115表达HcChi的干扰片段,用菌液持续饲喂美国白蛾幼虫,观察幼虫生长情况,定量PCR检测HcChi的转录水平.[结果]构建了带有HcChi-L4440表达载体的HT115菌株,经IPTG诱导能够合成HcChi-dsRNA,浓缩菌液持续饲喂幼虫显著抑制HcChi的表达,相对表达量显著下降了76.7 ％～90.3％,幼虫生长发育迟缓,体重增长量与对照相比显著减小40.7％.[结论]成功构建HcChi RNA干扰载体,通过饲喂法在美国白蛾中获得RNAi效应.该体系首次在美国白蛾中建立,为该物种的基因功能研究和生物防治提供新思路.
Construction of the Expression Vector and RNAi Mediated by Bacteria Expressed dsRNA of Chitinase Gene from Hyphantria cunea

王越、张苏芳、徐瑶、方加兴、孔祥波、刘福、张真

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中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,北京100091

美国白蛾 HT115菌株 L4440 几丁质酶 RNA干扰

林业公益性行业科研专项中国林科院森环森保所基本科研业务费专项资金

201504302CAFRIFEEP201406

2019

林业科学研究
中国林业科学研究院

林业科学研究

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.996
ISSN：1001-1498
年,卷(期)：2019.32(2)
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