目的:探讨苦参碱对胆囊癌细胞GBC-SD上皮间质转化(EMT)的抑制作用.方法:采用不同浓度苦参碱作用于GBC-SD细胞,噻唑蓝比色法(MTT)实验检测细胞增殖能力,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光染色形态分析细胞凋亡情况,细胞迁移实验(Transwell)小室侵袭检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Westernblot)分析上皮间质转化相关蛋白的含量.结果:苦参碱对GBC-SD细胞增殖抑制作用呈现时间和剂量的依赖性.浓度为0.1 mg/mL的苦参碱作用于GBC-SD细胞24 h、48 h后,细胞增殖的抑制率分别为14%和32%.浓度为0.5 mg/mL的苦参碱作用于GBC-SD细胞24 h、48 h后,细胞的增殖抑制率分别为92.3%和97.7%.随着苦参碱浓度增加,早期凋亡细胞数量增加,晚期凋亡细胞呈浓缩、不对称、局部桔黄色核EB染色.不同浓度的苦参碱(0.1、0.3和0.5 mg/mL)对GBS-CD细胞的迁移率依次为75.8%±8.6%、54.0%±8.7%和22.9%±5.6%.苦参碱能抑制GBS-CD细胞的迁移能力,并呈现出剂量依赖性.胆囊癌细胞GBC-SD的BCL2-Associated X蛋白质(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和人磷酸化AKT蛋白(P-Akt)表达量明显增加,B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)蛋白表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:苦参碱具有抗胆囊癌细胞增殖和侵袭的活性,并呈剂量和时间的依赖性,其机理与苦参碱能够抑制胆囊癌细胞EMT过程相关.
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