目的 探究卡马西平减轻脂多糖(LPS)诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞炎性损伤的作用效果及机制.方法 以HT22细胞为研究对象,体外传代培养,以10、20、50 μg/ml LPS进行试验,确定LPS对HT22细胞作用最佳浓度;将HT22细胞分为对照组(NC组,正常培养),LPS组(加入20 μg/ml LPS进行培养),LPS+卡马西平组(加入20μg/ml LPS和50μg/ml卡马西平进培养)3组,以CCK-8实验、DAPI染色法检测HT22增殖抑制率及凋亡率;采用H2DCFH-DA试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测HT22细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)及白细胞介素-17(IL-17)水平,Westernblot法检测HT22细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路相关蛋白表达.结果 20μg/ml LPS作用于HT22细胞48h,细胞增殖抑制率接近于50％.LPS组、LPS+卡马西平组细胞活性均低于NC组(均P＜0.05),LPS+卡马西平组细胞活性高于LPS组(P＜0.05).LPS组、LPS+卡马西平组细胞凋亡率均高于NC组(均P＜0.05),LPS+卡马西平组细胞凋亡率低于LPS组(P＜0.05).3组ROS差异有统计学意义(P＜0.05),LPS组＞LPS+卡马西平组＞NC组(均P＜0.05).LPS组、LPS+卡马西平组HT22细胞上清液IL-1β、TNF-α、IL-8及IL-17水平均高于NC组(均P＜0.05),而LPS+卡马西平组上述因子水平均低于LPS组(均P＜0.05).Western blot结果显示:与NC组相比,LPS组、LPS+卡马西平组HT22细胞中NLRP3、IL-1β、凋亡相关微粒蛋白(ASC)及pro-caspase1表达均显著上调(均P＜0.05),而与LPS组相比,LPS+卡马西平组上述因子的表达均显著下调(均P＜0.05).结论 卡马西平可通过介导NLRP3信号通路来调节细胞活性和细胞凋亡的平衡,进而减轻LPS诱导的HT22细胞的炎性损伤.
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