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转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖

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通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16SrDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16SrDNA序列同源性分析结果,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)2-37-4-1.确定了该菌株β-半乳糖苷酶产酶培养基的碳源为乳糖1%,氮源为蛋白胨0.5%和酵母膏0.5%,培养条件为37℃摇床培养18 h;碳源实验证明,该菌株β-半乳糖苷酶产生为乳糖诱导型.利用薄层层析技术研究了pH值、乳糖底物浓度、反应温度和反应时间对该菌株β-半乳糖苷酶以乳糖为底物转糖基合成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为pH7.5、50mmol/L(磷酸缓冲液)配制的40%乳糖溶液,55℃反应24h.转糖基反应产物高压液相色谱分析其组成为低聚半乳糖25.68%,双糖(包括乳糖和转移二糖)33.02%,葡萄糖26.37%和半乳糖14.92%.
Screening and identification of β-galactosidase-producing microorganism and enzymatic synthesis of galacto-oligosaccharides using its transgalactosylation

王红妹、肖敏、李正义、李玉梅、钱新民

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山东大学,微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100

枣庄学院,山东,枣庄,277100

巨大芽孢杆菌 16S rDNA β-半乳糖苷酶 转糖基作用 低聚半乳糖

国家科技攻关项目

2004BA713B04-06

2006

山东大学学报(理学版)
山东大学

山东大学学报(理学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.437
ISSN：1671-9352
年,卷(期)：2006.41(1)
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