摘要
目的 观察siRNA沉默树突状细胞(DCs)的恒定链(Ii)转染后对DCs活力及分化成熟的影响.方法 从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞,细胞经100 ng/mL 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和100 ng/mL白细胞介素-4(IL-4)诱导培养6 d后,转染针对DCs Ii链特异的小分子干扰RNA(Ii siRNA),转染后加用(或不加)50 ng/mL 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)继续诱导成熟48 h,分别通过Western blotting检测沉默效果,光镜观察DCs的活力和形态,流式细胞仪检测细胞的凋亡和表面分子标志(MHCⅡ、CD86、CD40),ELISA检测细胞IL-12p70的释放.结果 Ii siRNA能够明显抑制DCs Ii的表达,转染Ii siRNA后对DCs的活力、形态、细胞表型以及细胞因子IL-12p70的分泌均没有影响.结论 通过siRNA沉默DCs的Ii链不会影响DCs的活力及分化成熟,该策略能够用于进一步的DCs肿瘤疫苗的研究.