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盐胁迫下大麦酵母双杂交文库的构建与鉴定

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为研究盐胁迫下大麦耐盐相关蛋白的互作蛋白，利用Gateway技术构建盐胁迫下大麦的酵母双杂交文库。首先提取受盐胁迫的大麦总RNA，分离mRNA并合成双链cDNA，并通过位点特异重组系统(BP重组)将双链cDNA转入pDONR22载体，构建初级文库。然后，将初级文库质粒通过同源重组转入pGADT7-DEST载体，构建次级文库。最后，将次级文库质粒转入酵母菌株Y187中构建酵母双杂交文库。经鉴定，该酵母双杂交文库的滴度为7。0×107 CFU/mL，插入cDNA片段平均长度大于1 000 bp，重组率大于95。8％。所构建的酵母双杂交文库质量较高，可用于后续的互作蛋白筛选工作。
Construction and identification of yeast two hybrid library of barley under salinity stress

李颖波、宗营杰、刘成洪、陆瑞菊、黄剑华、杜志钊、许建华、王亦菲

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上海市农业科学院生物技术研究所,上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106

上海市农业科技服务中心,上海200335

光明种业有限公司,上海202171

盐胁迫 大麦 酵母双杂交 cDNA文库

国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目上海市科学技术委员会科研计划项目现代农业产业技术体系建设专项资金

31601295沪农科攻字2016第6-1-2号16391900600CARS-05-01A-02

2019

上海农业学报
上海市农业科学院,上海市农学会

上海农业学报

CSTPCD
影响因子：0.434
ISSN：1000-3924
年,卷(期)：2019.35(6)
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