摘要
目的:解析表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)氧化聚合的环境条件,及其稳定性变化对体外培养细胞系氧化还原平衡的影响,为深入探讨EGCG在细胞培养体系及活体中的作用机制奠定基础.方法:在无细胞体系中,设置不同的环境条件,溶液环境(H2O、RPM11640、DMEM)、温度(37和74 ℃)、EGCG浓度(0、20、40、80、320 μmol/L)、反应时间(3、6、12、24 h)、pH(5和9)等,通过检测OD578值变化评估EGCG在不同条件下氧化聚合的差异;分析EGCG氧化聚合变化对受试细胞内外H2O2水平的影响.结果:发现RPMI1640和DMEM培养液较H2O更利于EGCG的氧化聚合,高温高EGCG浓度及碱性条件促进EGCG氧化聚合,同时EGCG的氧化聚合随反应时间延长而加剧.在含有细胞的培养体系中EGCG也会发生自动氧化聚合并产生H2O2,导致细胞内外的H2O2浓度升高,但胞内H2O2浓度呈现先上升后下降的趋势.结论:溶液环境和pH变化是引起EGCG氧化聚合的关键因素,在细胞培养中20 μmol/L的EGCG可通过氧化聚合效应发挥更好的抗氧化活性.
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