摘要
应用酶反应动力学原理对海藻酸钠裂解酶酶活测定反应体系和反应条件进行系统研究,以改进海藻酸钠裂解酶的测定方法.本实验采用紫外吸收法测定酶活,改良后的酶活测定方法为:300 μL底物溶液(海藻酸钠2.2％,KCl 5 mmol/L,0.1 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液,pH7.0)加入50 μL 稀释至2.4～30 U/mL 的酶液,于37℃水浴静置反应20 min后用冰浴终止反应,反应液稀释20倍后在235 nm处测定吸光度.每份底物溶液均需用新枪头移取以提高精密度,使移液误差小于2％.本酶活测定方法的相对标准偏差小于5％.
基金项目
福州大学国家环境光催化工程技术研究中心开放课题(NERCEP-201906)
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