摘要
目的:研究超声波波辅助法提取沙棘叶多糖的最优工艺及其对结肠癌CT-26细胞的抑制作用.方法:首先选取超声波温度、超声波功率、超声波时间以及超声波次数进行了单因素实验,根据单因素结果进行正交优化来研究最佳的超声波辅助提取工艺,并采用MTT法、透射电镜、流式细胞术、RT-PCR和Western blot法对沙棘叶多糖抑制CT-26细胞的生长进行检测.结果:当超声波温度为70℃,超声波功率为400 W,超声波时间为30 min,超声波次数为2次时,沙棘叶多糖得率最大为7.93％±0.07％.各因素主次排序是:超声波功率>超声波时间>超声波温度>超声波次数.MTT结果显示不同浓度的沙棘叶多糖处理72 h后能够显著抑制CT-26细胞生长,当浓度为2000μg/mL时抑制作用最好;透射电镜观察沙棘叶多糖处理后细胞出现明显凋亡小体,并且沙棘叶多糖能够将CT-26细胞阻滞在S期,以及明显增加胞内Caspase-3、Bax蛋白和基因表达量,降低Bcl-2基因表达量来抑制CT-26细胞的生长.结论:通过优化得到沙棘叶多糖的最优提取工艺,多糖可以有效抑制CT-26细胞的增殖,为综合开发利用沙棘资源提供科学参考.
基金项目
吕梁市重点研发项目(农业领域)(2019NYGG-31)
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