β-葡萄糖苷酶的枯草芽孢杆菌表达、酶学性质分析及其在宝藿苷Ⅰ制备中的应用

Expression of Recombinant β-Glucosidase in Bacillus subtilis and Its Enzymatic Characterization and Application in Preparation of Icariside Ⅱ

裴雯雯 ¹曾艳 ²刘娟娟 ²张建刚 ¹王敏 ³孙媛霞²

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作者信息

1. 天津科技大学生物工程学院,天津 300457;中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程实验室,天津 300308
2. 中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程实验室,天津 300308
3. 天津科技大学生物工程学院,天津 300457
折叠

摘要

为获得安全高效的β-葡萄糖苷酶用于生物催化淫羊藿苷水解制备宝藿苷I,通过大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pMA5在食品安全菌株枯草芽孢杆菌WB600中异源表达Thermotoga petrophila来源的耐热β-葡萄糖苷酶TpBgl3,研究了所表达重组酶的酶学性质及其水解宝藿苷制备宝藿苷I的工艺条件.结果表明,菌株在30℃、SR培养基中发酵培养48 h后,上清液中的β-葡萄糖苷酶酶活力达到69.68 U/mL.重组表达的TpBgl3最适温度为85℃,最适pH为4.0,在65℃、pH4.0下放置3 h仍能保持85％以上的相对酶活.在65℃、pH4.0、酶用量0.16 U/mg、反应时间20 min的优化条件下,其能将10 g/L的淫羊藿苷水解转化为7.50 g/L的宝藿苷I,摩尔转化率为98.67％.β-葡萄糖苷酶的枯草芽孢杆菌分泌表达为宝藿苷I及其他高附加值苷元类化合物的工业化安全高效生物制备提供了新途径.

关键词

β-葡萄糖苷酶/枯草芽孢杆菌/异源表达/酶学性质/淫羊藿苷水解/宝藿苷I

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基金项目

国家重点研发计划(2021YFC2101403)

天津市合成生物技术创新能力提升行动项目(TSBICIP-KJGG-004)

中国科学院科技服务网络计划(KFJ-STS-QYZD-200)

出版年

2022

食品工业科技

北京一轻研究院

食品工业科技

CSTPCD北大核心

影响因子：0.842

ISSN：1002-0306

被引量3

参考文献量16

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