摘要
探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和I型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路.通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测序技术(RNA-seq)分析驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞的差异表达基因.结果表明,驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞无毒性,且在0.16～5.0 g/mL内对NHDFs细胞有一定的促生长作用.0.75～1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白能够促进NHDFs细胞增殖,且驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞增殖的影响呈现剂量依赖关系.1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白可显著促进NHDFs细胞迁移和I型胶原蛋白的分泌.驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞后,共筛选出384个差异表达基因,其中172个基因上调,212个基因下调.GO功能富集分析结果表明,差异表达基因与中性粒细胞趋化性、中性粒细胞迁移、粒细胞趋化性等有关;KEGG通路富集分析表明,差异基因参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、化学致癌、IL-17和TNF等重要生物学通路.推测,驴骨胶原蛋白可能通过IL-17和TNF-α介导CXCL趋化因子发挥促进皮肤伤口愈合的作用.本文明确了驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的效果,填补驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的研究空白,为驴骨胶原蛋白高值转化提供了思路.
基金项目
山东省泰山产业领军人才传统产业创新类项目(TSCY20170233)
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