摘要
目的:应用单因素实验和响应面法优化超声波提取冬凌草甲素工艺并探索冬凌草甲素的体外抗肿瘤活性.方法:通过单因素实验确定料液比、超声时间和超声功率的参数范围,经响应面法优化提取工艺;体外培养肿瘤细胞HepG2,经过对HepG2细胞存活率和凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9表达的研究,探讨冬凌草甲素的抗肿瘤活性.结果:超声波提取冬凌草甲素最佳工艺条件是:超声功率190 W,料液比1:18 g/mL时对冬凌草甲素进行1.5 h的提取,实现(4.122%±0.102%)的最大得率.体外抗肿瘤实验证实冬凌草甲素可以大幅降低HepG2细胞的存活率,增加Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,当冬凌草甲素浓度超过8μmol/L之后,对肝癌细胞存活率和凋亡蛋白的影响具有统计学意义(P<0.05).结论:通过响应面法优化超声波提取冬凌草甲素的工艺实现了4.122%的最大得率,经体外药理实验证实,冬凌草甲素通过线粒体介导的内源性途径促进细胞凋亡,降低肿瘤细胞的存活率,从而达到抑制肿瘤细胞的目的.