摘要
目的:响应面法优化纤维素酶协同超声波辅助提取北沙参多糖(Glehniae Radix polysaccharides,GLP)的工艺条件,并对其理化性质和免疫调节活性进行研究.方法:选择酶解时间、料液比、超声时间、超声温度、纤维素酶添加量为影响因素,以GLP的得率为评价指标,进行单因素考察.在此基础上,利用Box-Behnken响应面法进行提取工艺的优化.采用扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、热重分析-差示扫描量热仪(Thermogravimetric Analysis-Differential Scanning Calorimetry,TGA-DSC)、傅里叶变换红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectroscopy,FT-IR)以及高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对GLP的理化性质进行分析,通过体外试验评估其对RAW 264.7巨噬细胞的免疫调节作用.结果:GLP的最优提取工艺:酶解时间112min、料液比1∶30 g·mL-1、超声时间41min、超声温度65℃、酶添加量2%.在此条件下,GLP的得率为39.58%±0.90%.此外,GLP主要由葡萄糖组成,热稳定性良好.体外免疫调节活性结果表明,在0.5~250 μg·mL-1浓度范围内,GLP均能显著(P<0.05)促进RAW 264.7巨噬细胞的增殖,且在0.5~10μg,mL-1浓度范围内,显著(P<0.05)抑制LPS诱导的巨噬细胞过度活化.结论:该工艺稳定、可行,北沙参多糖GLP得率相对较高,且具有一定的免疫调节活性.
基金项目
河北省省级科技计划(H2021423057)
河北省中医药管理局中医药科研计划(2020331)
中央财政公共卫生专项中药资源普查项目(Z135080000022)