摘要
本文以猪血红蛋白(Porcine Hemoglobin,PHb)为原料,先利用差示扫描量热法、紫外-可见光谱分析、电位分析等方法对原料PHb的基本特性进行表征,然后制备亚硝基化猪血红蛋白(Porcine nitrosohemoglobin,PHbNO),并利用透析法对PHbNO的结构稳定性及机制进行初步探究.原料分析结果表明PHb的纯度、热稳定性、紫外光谱特征与PHb标品相比无明显差异;紫外-可见光谱分析表明,与PHb相比较,不透析和部分透析的PHbNO中卟啉结构发生明显变化,荧光光谱分析也表明不透析和部分透析的PHbNO结构以及色氨酸或酪氨酸残基周围的微环境发生明显改变,红外及圆二色谱结果显示PHbNO二级结构有明显变化,而彻底透析除去小分子的PHbNO四种光谱特征均与PHb基本相同,因此推断PHb亚硝基化属于可逆化学反应,PHbNO的稳定性取决于溶液中NO的浓度,PHbNO稳定性及机制为:在酸性溶液下,NaNO2生成的NO与PHb中Fe2+发生可逆配位反应生成PHbNO,因此产物稳定性对反应物具有依赖性.本研究为PHbNO的进一步研究和应用提供了理论依据和数据支持.
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