摘要
本研究建立了一种能够快速检测食品中菰米成分的TaqMan实时荧光PCR方法.以菰米核糖体内转录间隔区(internal transcribed space,ITS)基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,建立菰米成分的实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性分析、灵敏度分析以及实际应用检测.结果显示:本研究所建立的实时荧光PCR检测方法特异性强,仅对菰米品种中国菰(Z.latifolia)、水生菰(Z.aquatica)、沼生菰(Z.palustris)和德克萨斯菰(Z.texana)基因组DNA出现特异性扩增曲线,供试的其他30种谷物以及异源性动植物基因组DNA均无扩增曲线;该方法对菰米成分检测的灵敏度为0.001 ng/μL菰米基因组DNA或0.01％(W/W)菰米粉.应用该方法对100份市售的进口菰米、菰米碎米、杂粮米及混合米粉等样品进行检测,在80份进口菰米和5份菰米碎米中检测出菰米成分,其他样品中未检出菰米成分,与商品标识一致.该方法灵敏度高,特异性强,可快速高效地进行菰米成分的真实性甄别.
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