摘要
本文以大豆混合过敏原为目标,建立了快速、便捷检测大豆过敏原的夹心酶联免疫吸附方法(sandwich-enzyme linked immunosorbent assay)和间接竞争酶联免疫吸附方法(indirect competitive enzyme-linked immuno-sorbent assay),通过实际加工样品的回收实验、加标食品回收实验以及对真实食物样本的检测,对这两种方法进行了比较,确定了各自的适用范围.结果表明,夹心ELISA方法标准品浓度在0.0078～30μg/mL范围内呈现出良好的线性关系,曲线方程为y=0.2333x+0.0692,决定系数R2=0.995.竞争ELISA方法的检测范围为10～100000 ng/mL,最低检测限为10 ng/mL.对购入橙汁进行加标回收实验,夹心ELISA检测后的回收率要高于竞争ELISA检测后的回收率,达100％以上;而对成分和加工方式都比较复杂的巧克力、牛肉酱、面包或蛋糕来说,竞争ELISA检测后的回收率要高于夹心ELISA检测后的回收率.对发酵类食物进行检测,竞争ELISA方法检测到的浓度要高于夹心ELISA,而对成分比较简单的食物比如芝麻糊、豆奶等进行检测时,夹心ELISA的检测浓度要略高于竞争ELISA.综上,竞争ELISA方法更适用于食物基质复杂,经过深度加工的食品,而夹心ELISA方法更适用于食物成分简单,轻加工后的食品,两种方法在各自的适用范围内均能实现较准确的检测.
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