摘要
目的:为获得牛肝菌人工纯菌株,提高液态培养菌丝及产三萜类物质的能力.方法:以云南鲜野生牛肝菌子实体为研究对象,采用组织分离法进行母体纯菌株分离并鉴定;以金属离子Ca2+、亚油酸及香菇水提物作为诱导剂,研究其对液态菌丝体中三萜类物质含量的影响.结果:经多次分离纯化获得1株纯菌种NG-3,经rDNA-ITS分子生物学鉴定,NG-3为暗褐网柄牛肝菌(Phlebopus portentosus);对NG-3菌丝体进行SEM观察,在培养8～16 d时,出现具有结实能力的锁状联合形态菌丝.对3种诱导剂进行了响应面法优化,得到的结果为Ca2+浓度12 mmol/L、亚油酸量4％、香菇水提物浓度150 mg/100 mL,此时三萜含量为6.77 mg/g,比未加诱导剂三萜含量提高了76.00％.结论:3种诱导剂复合使用能够促进三萜类物质合成,提高其含量,为解决野生资源不足、实现牛肝菌功能产品产业化提供技术参数.
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