摘要
利用毛霉和米根霉混合发酵藜麦制备藜麦源血管紧张素转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制糖肽.通过单因素实验和响应面试验优化发酵工艺条件,发酵液经真空浓缩、醇沉、葡聚糖凝胶G-15和反相高效液相色谱分离纯化,利用傅里叶红外光谱法判断官能团构成,β-消除法判断糖肽键链接方式,并分析温度、pH、金属离子以及体外模拟消化对活性的影响.结果表明:在料液比1:18 g/mL、毛霉与米根霉接种量比1:1、总接种量2.8％(φ)、发酵时间8.7 d时,得到ACE抑制率为64.22％±4.57％的藜麦发酵液,分离纯化后获得单一组分F3b.利用傅里叶红外光谱检测,发现F3b具有多肽和多糖的特征吸收,β-消除法确定其存在O-糖肽键.体外稳定性研究结果表明,温度(25～55℃)对F3b活性影响较小,100℃处理后ACE抑制率为25℃时的86.23％±3.47％;不同pH条件(pH2～12)对其活性无显著影响(P>0.05);在Zn2+和Fe3+浓度为4 mmol/L时,ACE抑制率分别为对照的109.91％±8.12％和117.43％±6.78％,增强其活性;相同浓度的K+和Ca2+减弱其活性,ACE抑制率分别为对照的78.94％±2.18％和85.31％±4.99％;模拟胃肠消化过程中,F3b活性略有降低,ACE抑制率为对照的70.00％±3.30％.该研究丰富了ACE抑制肽的种类,为藜麦资源高值化利用提供理论和数据技术参考.
基金项目
食品科学与工程浙江省重中之重一级学科资助项目(2017SIAR221)
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