摘要
青钱柳多糖具有较强的降血糖和抗氧化活性,脱除蛋白对青钱柳多糖的纯化至关重要.为探索最适合青钱柳多糖的除蛋白方式,本文采用了三种除蛋白方法(HCl法、TCA法、NaCl法)对青钱柳粗多糖进行处理,同时采用高效液相凝胶色谱法、离子色谱法、傅里叶红外光谱法对三种脱蛋白方式得到的多糖的结构和成分进行分析,接着通过测定其对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基的清除率评价其抗氧化能力.结果表明:HCl法在pH2时,蛋白脱除率为73.48%,多糖保留率为74.86%;TCA法在TCA体积分数为2%时,蛋白脱除率为79.88%,多糖保留率为81.78%;NaCl法在NaCl体积分数为7%时,蛋白脱除率为47.90%,多糖保留率为82.51%.三种除蛋白方法处理后得到的多糖主要包括三个不同分子量范围的组分:500~750 kDa,100~130 kDa和 30~40 kDa左右的部分,但其比例各不相同,TCA法处理的多糖在100~130 kDa占比最大,NaCl法处理的多糖在30~40 kDa占比最大.三种多糖均由8种单糖组成,但其摩尔比不相同,HCl法处理后多糖中阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖的含量最大,TCA法处理后多糖中糖醛酸的含量更高,NaCl法处理后多糖中的鼠李糖、木糖和甘露糖的含量最大.通过比较同浓度下三种多糖对自由基的清除能力发现,TCA法处理的多糖抗氧化能力最强,HCl法次之,NaCl法最弱.由研究结果表明,不同的除蛋白方法会对青钱柳多糖的结构和活性产生不同的影响,其中TCA法是一种较好的青钱柳多糖脱除蛋白的方式.
基金项目
国家自然科学基金(31560459)
江西省自然科学基金(20224ACB205014)
江西省主要学科学术和技术带头人计划(20182BCB22003)