摘要
目的:为了更好的开发鹿茸的高价值产品,本研究确定了碱性蛋白酶酶解鹿茸肽的最佳工艺条件,并对其体外抗蓝光活性进行评价.方法:选择酶解温度、酶底比、酶解时间、pH四个因素,每个因素三个水平,在单因素实验的基础上进行正交实验优化,以鹿茸肽酶解收率为指标,获得酶解鹿茸肽的最佳工艺,测定鹿茸肽的含量;利用CCK-8法检测不同浓度鹿茸肽培养下的人类永生化表皮细胞(Human immortal keratinocyte line,HaCat)在蓝光照射后的存活率;ELISA法分析超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(Glutathione-reduced,GSH)的分泌水平以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;紫外法计算鹿茸肽对DPPH自由基、OH自由基清除的能力.结果:最佳鹿茸肽酶解工艺条件为温度 45℃,酶解时长 5 h,pH8.5,酶底比 6%,此时的鹿茸肽酶解收率为 52.7%;设置不同浓度鹿茸肽给药组(12.5、25、50、75、100 μg/mL),与蓝光照射模型组相比,给药组能够减轻蓝光照射对HaCat细胞增殖活力的抑制作用,提高细胞存活率,具有显著性差异(P<0.01),同时给药组SOD、GSH分泌水平升高,MDA含量下降(P<0.05);另外,鹿茸肽对DPPH自由基、OH自由基的清除能力较强,其IC50 分别是 0.98和 0.63 mg/mL.结论:鹿茸肽具有较好的抗蓝光活性,对皮肤美白、抗衰老和损伤修复具有一定的作用,这为鹿茸的精深加工和开发利用提供了理论依据.
基金项目
国家级大学生创新创业训练计划(202110199020)
吉林省卫生与健康科技能力提升计划(2020Q026)
吉林省大学生创新创业训练计划(S202210199030)
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