摘要
为开发我国丰富的杜仲叶资源,研究超声波-微波辅助提取杜仲叶多糖的最优工艺条件及其理化性质和体外抗凝血活性.首先通过单因素实验确定超声波功率、提取温度、微波功率、料液比、提取时间等影响多糖得率因素的范围,然后通过Plackett-Burman试验筛选关键影响因素,再采用Box-Behnken试验对工艺条件进行优化,分析了所得杜仲叶精制多糖的分子量、单糖组成等理化性质及活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)等抗凝血指标.结果表明,料液比、提取时间、提取温度为关键影响因素,最优提取工艺条件为超声波功率 130 W、提取温度 49℃、微波功率 200 W、料液比 1:30(g:mL)、提取时间 20 min.在此条件下,杜仲叶多糖的实际得率为 4.02%±0.03%,与理论得率 4.08%接近.所得杜仲叶精制多糖的重均分子质量(Mw)为 1653 kDa,单糖组成及摩尔比为果糖 37.3%、葡萄糖 35%、N-乙酰-D氨基葡萄糖 14.6%、半乳糖8.6%、阿拉伯糖 4.4%.分析结果显示,杜仲叶多糖为β型酸性多糖.与阴性对照相比,杜仲叶多糖能极显著延长APTT(P<0.01),而当杜仲叶多糖浓度为 8 mg/mL时,PT、TT亦能极显著延长(P<0.01),说明杜仲叶多糖主要通过内源性途径影响凝血系统,同时也能够通过外源性、共同途径来影响凝血过程.此研究可为我国丰富的杜仲叶资源的高值化开发利用提供理论依据和技术参考.
基金项目
湖南省教育厅重点科学研究项目(19A396)
湖南省科技成果转化及产业化计划高新技术产业科技创新引领计划(科技攻关类)(2020SK2028)
中药饮片全产业链质量标准体系构建项目(2019KT1261)
广东省药品监督管理局中药全产业链质量评价重点实验室项目(2020ZDB25)
吉首大学研究生科研项目(Jdy22073)
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