摘要
目的:筛选茶叶中具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的肽段.方法:采用响应面法优化茶叶酶解产物制备工艺,超滤亲和法分离与α-葡萄糖苷酶结合的茶多肽,液相色谱-质谱联用对分离肽段进行序列测定,生物信息学方法进行虚拟筛选.结果:茶叶酶解产物最佳制备工艺为碱性蛋白酶酶解温度50℃,酶解时间3 h,液料比10∶1(mL/g),对α-葡萄糖苷酶抑制率为 57.29%,从中鉴定出 624条肽段,筛选出一条四肽LIGF具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,在 5 mg/mL的浓度下对α-葡萄糖苷酶的最大抑制率为 88.13%,IC50 值为 1.22 mg/mL.分子对接显示,LIGF与α-葡萄糖苷酶能形成 5个氢键,结合能为-3.51 kJ,具有高的亲和力、稳定性以及与α-葡萄糖苷酶结合的能力.结论:LIGF具有成为Ⅱ型糖尿病治疗药物的潜在价值.
基金项目
陕西省教育厅重点项目(21JY007)
陕西省科技厅项目(2022NY-041)
秦巴生物资源与生态环境国家重点实验室(培育)"市校共建"科研专项(SXC-2112)
陕西省2021年中央引导地方科技创新专项资金计划(2021ZY2-JD-19)