摘要
采用不同蛋白酶水解澳洲坚果粕制备多肽,以ABTS+自由基清除率为评价指标,筛选制备抗氧化多肽适宜的蛋白酶.利用DA201-C大孔树脂纯化、超滤膜逐级分离,获得不同分子量澳洲坚果多肽(MNAP-1、MNAP-2、MNAP-3、MNAP-4)组分,并以谷胱甘肽为对照,研究了其对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力及还原能力.结果表明:制备澳洲坚果抗氧化多肽的适宜蛋白酶为复配蛋白酶,相同浓度下其对ABTS+自由基清除能力优于中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶与菠萝蛋白酶.不同分子量澳洲坚果多肽呈现不同的抗氧化效果,其对DPPH、ABTS+自由基具有较强的清除作用,具有一定的羟基自由基清除能力和还原能力.其中,MNAP-4(分子量小于 1000 Da)的抗氧化活性最好,其对DPPH、ABTS+、羟基自由基清除能力及还原能力的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为 0.36、6.75、0.08、3.19 mg/mL,低于其他分子量多肽.相关性分析得出不同分子量澳洲坚果多肽与其清除DPPH自由基(r=0.947,P<0.01)、羟基自由基(r=0.964,P<0.01)、ABTS+自由基(r=0.948,P<0.01)及还原能力(r=0.856,P<0.01)之间存在极显著相关.澳洲坚果复配蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性较好的肽类,研究结果可为其抗氧化肽的制备与应用提供一定的理论依据.
基金项目
云南省重大科技专项(202202AE090006)
云南省盈江县澳洲坚果产业科技特派团项目(202104BI090004)
云南省热带作物科技创新体系建设专项(RF2023-15)
兴滇英才支持计划()
云南省科技人才和平台计划()
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