摘要
采用网络药理学方法预测软儿梨止咳化痰作用及其机制,并采用分子对接和动物实验对预测结果予以验证.通过文献调研和 TCMSP等数据库筛选得到软儿梨的成分与作用靶点,与 GeneCards数据库中"咳嗽(cough)"和"痰(sputum)"相关的两组基因相映射,得到软儿梨止咳化痰作用的靶点基因.通过Metascape平台对靶点基因进行GO和KEGG富集分析;通过STRING数据平台构建靶点基因间PPI网络;利用Cytoscape插件CytoHubba筛选软儿梨止咳化痰作用Top10基因,并通过Metascape数据平台对Top10基因进行KEGG通路富集以预测软儿梨止咳化痰作用可能涉及的信号通路.通过Autodock Vina对预测所得Top10基因蛋白和软儿梨Top3活性成分进行分子对接;最后通过氨水引咳试验和酚红排泄试验对预测所得结果进行验证.经多数据库联合分析,发现软儿梨中已见报道的化学成分有 51个,对应作用靶点 282个,其中 80个与止咳化痰作用有关,根据Degree值筛选出的Top10基因主要富集在与感染和免疫相关通路上.分子对接试验证明Top10基因与PPI网络中排名前 3位的化学成分(咖啡酸、芦丁、戊醛)有较强的结合活性.动物实验证明软儿梨可以明显抑制小鼠氨水引发的咳嗽反应,降低血清中IL-6和IL-13水平,增加小鼠气管酚红的排泄量.PCR和WB检测发现,软儿梨可降低炎症相关基因IL6、IL1B、VEGFA、PTGS2、MAPK3的mRNA水平和蛋白表达,软儿梨的止咳化痰作用可能与降低炎性基因表达,减少致炎因子释放有关.
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