摘要
本实验旨在优化半枝莲总黄酮提取工艺,评价半枝莲总黄酮纯化物抗氧化、抗肿瘤活性.采用单因素实验结合响应面Box-Behnken设计对半枝莲总黄酮提取工艺进行研究,主要考察了提取时间、料液比、提取温度和乙醇体积分数对黄酮得率的影响,从而得出半枝莲总黄酮提取的最佳工艺;采用DPPH、ABTS法检测半枝莲总黄酮纯化物的抗氧化活性;采用MTT法检测纯化物对NCI-H1299、HepG2、MHCC-97H、HuH-7细胞增殖的影响.结果表明,半枝莲总黄酮提取最佳工艺为提取时间 93 min、料液比 1:41(g/mL)、提取温度为 68℃、乙醇体积分数为 75%,该条件下半枝莲总黄酮得率为 26.46 mg/g.抗氧化实验结果表明,半枝莲总黄酮纯化物对DPPH、ABTS+自由基有较好的清除作用,IC50 值分别为 25.41、70.41 μg/mL;抗肿瘤实验表明,在一定浓度范围内不同质量浓度的半枝莲总黄酮纯化物对肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用,其NCI-H1299、HepG2、MHCC-97H、HuH-7细胞的IC50 值分别为 168.6、330.5、269.2、335.8 μg/mL.综上可知,该方法稳定可行、重复性好,能有效提取出半枝莲中总黄酮成分,且纯化后的半枝莲总黄酮具有良好的抗氧化及抗肿瘤活性,可以进行功能性食品的研发.
基金项目
国家中医药局中药炮制技术传承基地建设项目()
中药材炮制开放基金(2020)(ZYPZ202001)
湖南省自然科学基金(2020JJ9007)
湖南省自然科学基金(2021JJ8006)
湖南中医药大学校级基金(2019XJJJ053)
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