摘要
本研究通过大鼠肠囊外翻法探讨了<3 kDa核桃蛋白肽模拟胃肠消化产物的吸收特性,以抗氧化能力(DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、Fe2+螯合率)和活性肽吸收率为指标筛选核桃肽在肠道吸收的最优条件,并应用模拟分子对接技术和Nano-HPLC-MS/MS技术对吸收肽组分进行筛选和鉴定,得到能够以完整形式被吸收并发挥抗氧化活性的新型核桃源肽.结果表明:当核桃肽消化产物吸收浓度为 6 mg/mL,吸收时间为 2h时,其抗氧化活性最高且在小肠吸收率最高;进一步通过Nano-HPLC-MS/MS鉴定结果表明 0.5～1 kDa活性肽数量最多,其中位于C端/N端氨基酸主要集中在Pro、Thr、Leu,鉴定出 33条活性肽能够以完整形式被吸收,穿过肠道屏障;最后通过分子对接技术与DPP-IV相结合,获得三条结合能最低的活性肽NLRFPL、NPDDEFRPQ、KGHLFPN,其结合能分别为-8.8、-8.6、-8.6 kal/mol,其中KGHLFPN抗氧化能力最强.综上,<3 kDa核桃肽模拟胃肠道消化能够释放抗氧化活性更高且能够被小肠吸收的活性肽为KGHLFPN,本文为探索外源肽小肠吸收特性及筛选鉴定抗氧化肽提供新思路.
基金项目
国家自然科学基金青年科学基金(32101934)
吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20220346KJ)
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