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浑浊米醋Bacillus subtilis分离鉴定及灭菌条件研究

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利用稀释平板法从米醋沉淀中分离获得细菌,通过对其进行16S rDNA分子鉴定,表明该细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).以该菌为实验材料,研究了细菌基因组DNA的提取方法.并将ERIC-PCR法首次应用于醋液菌种,对此反应体系的主要因素进行了优化,最终建立了适合的ERIC-PCR体系.结果表明,采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要;建立的反应体系为:25μL反应体积10x扩增缓冲液(含Mg2+)2.5μL,20 pmo/μL ERIC-PCR引物E1 1.0μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E2 1.0μL,DNA 模板2μL,2.5 mmol/L dNTPs混合液1.6μL,taq聚合酶0.9μL,双蒸水补齐;PCR反应程序为:94℃变性4 min,1个循环;94℃变性30 s,58℃退火40 s,72℃延伸1 min.30个循环;72℃延伸4 min.最后对老陈醋浑浊沉淀原因进行了探讨.
Isolate and identificate to the Bacillus subtilis from muddy rice vinegar and study the conditions of sterilization

任文雅、孙宝国、廖永红、徐瑾、沈晗

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北京工商大学化学与环境工程学院,北京,100037

枯草芽孢杆菌 米醋 分离 DNA提取 ERIC-PCR

国家科技支撑项目

2010

食品科技
北京市粮食科学研究所

食品科技

北大核心
影响因子：0.622
ISSN：1005-9989
年,卷(期)：2010.(12)
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