摘要
目的:以金黄色葡萄球菌为宿主菌,分离裂解性噬菌体vB_SauM_RS,测定其生物学特性,并探究其在两种牛奶中的抑菌效果及对生物被膜的清除作用.方法:将噬菌体与金黄色葡萄球菌以1∶100的比例(菌体数量比)分别接种于脱脂牛奶和全脂牛奶中,分别在4℃和25 ℃环境下处理,测定不同时间脱脂牛奶和全脂牛奶中细菌浓度和噬菌体效价,分析噬菌体在两种牛奶中的抑菌效果;之后通过结晶紫染色、平板计数法和双层平板法测定经噬菌体处理后不同时间膜内细菌浓度和噬菌体效价,分析vB_SauM_RS对不同材料表面生物被膜的清除效果,并通过荧光显微镜观察生物被膜清除前后膜内细菌数量的变化.结果:vB_SauM_RS形成的噬菌斑清晰透亮、外有晕环;透射电子显微镜观察其属于肌尾噬菌体科;最佳感染复数为0.01、潜伏期为20 min、平均裂解量为39PFU/cell,其在20～50℃和pH4.0～11.0条件下稳定,具有高效的裂解效率;vB_SauM_RS在牛奶中抑菌作用明显,与对照组相比,在低温(4℃)条件下24h使脱脂牛奶和全脂牛奶中细菌浓度分别下降1.079(1g(CFU/mL))和1.021(1g(CFU/mL)),在室温(25 ℃)条件下24 h使脱脂牛奶和全脂牛奶中细菌浓度分别下降5.418(1g(CFU/mL))和5.740(1g(CFU/mL));通过平板计数法和荧光显微镜观察显示vB_SauM_RS对生物被膜内细菌的清除效果明显,对不同材料表面生物被膜均有良好的清除效果.结论:vB_SauM_RS不仅对牛奶中金黄色葡萄球菌有良好的裂解效果,对生物被膜也有很好的清除效果,具有作为金黄色葡萄球菌生物抗菌剂的应用潜力.
基金项目
国家自然科学基金青年科学基金(31802226)
黑龙江省青年科学基金(QC2017021)
黑龙江省政府博士后资助项目(LBH-Z17185)
黑龙江省牛病防制重点实验室开放课题(PCBD201710)
黑龙江八一农垦大学三横三纵支持计划项目(TDJH201903)
黑龙江八一农垦大学引进人才项目(XYB201807)
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