β-乳球蛋白聚乙二醇定点修饰物的制备及其抗原性变化

Preparation and Antigenicity of Site-specific PEGylated Beta-lactoglobulin

刘成梅 ¹江辛琳 ¹李冬梅 ²周磊 ¹钟俊桢 ¹吉莉 ¹罗舜菁¹

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作者信息

1. 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047
2. 江西丹霞生物科技股份有限公司,江西鹰潭 335200
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摘要

为探究不同共价修饰位点对β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)抗原性影响,采用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)定点修饰技术对β-LG第121位半胱氨酸(Cys121)游离巯基进行修饰.通过单因素试验优化,得到最佳修饰条件:β-LG与mPEG-MAL物质的量比1∶30,在0.1 mol/L,pH7.0的磷酸钠缓冲液(含3倍物质的量的TCEP,25％乙醇及2mmol/LEDTA)中4℃反应24h.使用优化条件制备产物修饰率达64.1％,分离纯化后产物纯度达94％.游离巯基含量测定结果显示修饰后β-LG游离巯基含量由52.3 μmol/g降为0.3 μmol/g.经验证mPEG-MAL与β-LGCys121游离巯基发生特异性结合.经巯基定点修饰后,β-LG-MAL较天然β-LG抗原性显著提升25.9％,巯基修饰与前期不同位点修饰抗原性结果相反,定点修饰能有效探究不同位点共价修饰对蛋白抗原性的影响.

关键词

β-乳球蛋白/聚乙二醇/共价修饰/定点修饰/抗原性

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基金项目

国家自然科学基金地区科学基金(31560435)

出版年

2021

食品科学

北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：1.327

ISSN：1002-6630

被引量1

参考文献量7

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