代谢工程优化大肠杆菌高效合成L-苯丙氨酸

Metabolic Engineering of Escherichia coli for Efficient Synthesis of L-Phenylalanine

门佳轩 ¹熊博 ¹郝亚男 ¹李旋 ¹刘益宁 ¹谢希贤¹

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作者信息

1. 天津科技大学生物工程学院,代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津 300457
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摘要

为获得1 株稳定高产的L-苯丙氨酸工程菌株,利用规律间隔成簇短回文重复序列/Cas9技术,在大肠杆菌W3110中引入己解除反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶PheA,随后利用不同强度的启动子对莽草酸途径中各反应酶进行调控,并通过摇瓶发酵确定了莽草酸途径各步反应酶的最适表达强度,最后通过增加前体物磷酸烯醇式丙酮酸供应,获得了 1株性能最佳的L-苯丙氨酸工程菌株PHE12.利用该菌株进行摇瓶发酵24 h,L-苯丙氨酸产量达20.5g/L.利用发酵罐分批补料发酵48 h后,L-苯丙氨酸产量达81.8g/L,与目前文献报道的最高产量相比产量提高了 12.2％,生产强度和糖酸转化率(葡萄糖计)分别为1.7 g/(L·h)和0.24g/g,工业前景良好.

关键词

L-苯丙氨酸/大肠杆菌/规律间隔成簇短回文重复序列/Cas9/发酵生产

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基金项目

"十三五"国家重点研发计划重点专项(2018YFA0900304)

出版年

2021

食品科学

北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：1.327

ISSN：1002-6630

被引量4

参考文献量2

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