食品科学2021，Vol.42Issue(4) ：145-152.

黄杆菌褐藻胶裂解酶的高效表达及其在褐藻寡糖制备中的应用

High Level Expression of Alginate Lyase from Flavobacterium sp. and Its Application in Preparation of Alginate Oligosaccharides

江君 刘军 杨绍青 马帅 闫巧娟 江正强
食品科学2021，Vol.42Issue(4) ：145-152.
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黄杆菌褐藻胶裂解酶的高效表达及其在褐藻寡糖制备中的应用

High Level Expression of Alginate Lyase from Flavobacterium sp. and Its Application in Preparation of Alginate Oligosaccharides

江君 1刘军 1杨绍青 1马帅 1闫巧娟 2江正强1
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作者信息

  • 1. 中国农业大学食品科学与营养工程学院,中国轻工业食品生物工程重点实验室,北京 100083
  • 2. 中国农业大学工学院,北京 100083
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摘要

研究黄杆菌褐藻胶裂解酶基因(rFlAlyA)在枯草芽孢杆菌中的高效表达,高密度发酵48 h最高酶活力为2550 U/mL,蛋白质量浓度达4.5 mg/mL.经(NH4)2SO4沉淀和SP强阳离子交换柱纯化后得到电泳级纯酶,分子质量约为30 kDa.褐藻胶裂解酶rFlAlyA最适pH值为7.5,在pH 4.0～11.0范围内可保持80％以上酶活力;最适温度为50℃,在50℃及以下可保持80％以上酶活力.底物特异性分析表明,rFlAlyA特异性降解聚甘露糖醛酸片段,最短链底物为甘露糖醛酸三糖.rFlAlyA在最适条件下酶解褐藻酸钠4 h后还原糖质量浓度达33 mg/mL,底物转化率为70.1％,电喷雾电离-质谱分析酶解产物的聚合度(degree of polymerization,DP)为1～8,离子色谱分析显示DP=3时相对含量最高,为34.0％.结果表明,经枯草芽孢杆菌高效表达的rFlAlyA可用于制备褐藻寡糖.

关键词

褐藻胶裂解酶/黄杆菌/枯草芽孢杆菌/高密度发酵/褐藻寡糖

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基金项目

"十三五"国家重点研发计划重点专项(2017YFD0400204)

出版年

2021
食品科学
北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.327
ISSN：1002-6630
被引量4
参考文献量36
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