摘要
本实验从黑豆中分离得到两种糖蛋白,并对其结构组成、抗氧化活性和免疫活性进行研究,为糖蛋白的高效开发利用提供理论依据.采用碱提醇沉法提取黑豆糖蛋白粗品,命名为HDJ,通过DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析分离纯化获得两个均一组分,分别命名为HDJS2和HDJS5-2.利用物理化学方法和光谱法对其化学组成及结构进行分析,通过测定总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)清除率及总抗氧化能力研究两种糖蛋白的抗氧化活性,采用噻唑蓝比色法评价两种糖蛋白的免疫活性.结果表明:HDJS2(3.20×104 Da)和HDJS5-2(3.89×104 Da)主要是由中性糖和蛋白质组成的糖蛋白,其糖肽键类型均为O-型糖肽键.HDJS2主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖和96.1％氨基酸组成;HDJS5-2主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和71.3％氨基酸组成.抗氧化分析结果表明,HDJS2和HDJS5-2的还原能力、DPPH清除能力和抗氧化能力呈剂量依赖性关系.此外,HDJS2和HDJS5-2均能够促进脾淋巴细胞增殖.结论:HDJS2和HDJS5-2具有潜在的抗氧化作用和免疫调节作用.
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