摘要
以金纳米颗粒(gold nanoparticles,AuNPs)为信号放大载体,利用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的二抗为信号探针,建立一种基于AuNPs的信号放大酶联免疫检测方法(AuNPs signal amplification enzyme-linked immunosorbent assay,AuNPs-HRP-IgG ic-ELISA),检测食品中恩诺沙星(enrofloxacin,ENR).该方法对ENR的检测限(IC15)为5×10-4 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为0.24 ng/mL,检测范围为0.16～500 ng/mL,与建立的传统ELISA方法(IC50=8.76 ng/mL)相比,显著提高了检测灵敏度,并且该方法与环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星交叉反应率均小于0.1％,具有良好的特异性.该AuNPs-HRP-IgG ic-ELISA方法的实用性得到了样品添加回收实验和商业化ELISA检测试剂盒的验证,其在牛奶样品中的加标回收率可达80.52％～102.66％,适用于实际牛奶样本中ENR的快速灵敏检测,也为建立其他食品危害物质的精准检测技术开发提供参考.
基金项目
十三五国家重点研发计划重点专项(2016YFD0401101)
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