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4种动物源性成分多重real-time PCR检测方法的建立及其在驴肉制品检测中的应用

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建立一种同时快速检测驴、马、猪及鸭源性成分的四重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法.分别以4种源性成分的Nad5、ATpase6、ATP8、cytb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重real-time PCR方法,并对该方法进行方法学验证,同时对不同掺入比例模拟样品、不同加工工艺模拟样品和实际驴肉样品进行检测.结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点.当Ct值≤35.0时,方法对16种非目标源性具有良好特异性;灵敏度可检测到质量浓度为2×10-4ng/μL的模板DNA;对生肉的检出限为肉含量的0.001％,对熟肉制品的检出限为肉含量的0.01％;对100份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可用于肉及肉制品中常见掺假源性成分的检测.
Establishment and Application of Multiplex Real-Time PCR Method for Rapid Detection of Four Animal-Derived Components in Donkey Meat Products

范维、高晓月、李贺楠、董雨馨、刘虹宇、李宇轩、郭文萍

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中国肉类食品综合研究中心,北京食品科学研究院,北京 100068

多重实时聚合酶链式反应 掺假鉴别 驴肉 马肉 猪肉 鸭肉

"十三五"国家重点研发计划重点专项北京市优秀人才培养资助青年骨干个人项目

2018YFC16034002017754154700G101

2023

10.7506/spkx1002-6630-20220406-056

食品科学
北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.327
ISSN：1002-6630
年,卷(期)：2023.44(8)
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